华北农学报

作者：张梦雅, 龚珂珂, 董志平, 刘佳, 马继芳, 王永芳, 刘磊, 全建章, 李志勇, 白辉

单位：1 河北省农林科学院 谷子研究所,农业农村部特色杂粮遗传改良与利用重点实验室(省部共建),河北省杂粮研究重点实验室,河北 石家庄 050035；2 河南科技大学 农学院,河南 洛阳 471023

关键词：谷子线虫病,贝西滑刃线虫,DNA提取,特异性PCR,快速检测,

基金：河北省农林科学院基本科研业务费试点经费包干制项目(HBNKY-BGZ-02); 国家自然科学基金项目(31872880); 国家现代农业产业技术体系专项(CARS-06-14.5-A25); 河北省现代农业产业技术体系建设专项资金(HBCT2024080204)

为更好地解决谷子带线虫检测出现的假阳性问题,建立一种稳定、高效、低成本的谷子带病原线虫检测体系,以带线虫谷粒济谷20为供试材料,对医用棉纱布、粗尼龙纱布和细尼龙纱布3种介质包裹下洗脱的线虫数量进行比较;吸出单条线虫后,探究了切割、冻融、酶裂解等方法对提取单条线虫DNA的效果影响;并利用该体系对2018,2020,2021年来源不同种子公司共计109份谷子种子样品进行带线虫检测。最终确定的检测体系为:用细尼龙纱布包裹1.5 g种子浸泡4 h,混匀洗脱液后在显微镜下计数进行线虫定量,采用酶裂解法提取线虫DNA,利用贝西滑刃线虫特异性引物进行PCR扩增对谷子病原线虫定性。供检的109份谷子种子样本共检测出4份带线虫种子,每1.5 g带线虫量均为5条,病原线虫经分子鉴定为贝西滑刃线虫。先定量再定性的线虫检测体系可用于大批量谷子种子带线虫样本的快速检测,为谷子线虫病的早期诊断和监测防控提供技术支持。

来源：2025年第S1期

《华北农学报》期刊编辑部

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