华北农学报

作者：徐佳微, 李铁山, 李昕, 刘意, 赵格, 曲志娜, 宋时萍, 张喜悦, 王君玮

单位：1 中国动物卫生与流行病学中心,致病微生物监测室,山东 青岛 266032；2 青岛大学附属医院康复二科,山东 青岛 266003

关键词：大肠杆菌,多表位疫苗,免疫信息学,987P,F18,

基金：国家重点研发计划项目(2022YFC2303900); 国家重点研发计划项目(2022YFD1301003); 山东省重点研发计划项目(2022CXGC010606-01-05); 中国动物卫生与流行病学中心创新基金项目(DW2021001-13)

利用免疫信息学方法设计一种预防猪大肠杆菌感染的多表位疫苗,阻断产肠毒素大肠杆菌(ETEC)菌株与仔猪肠道上皮细胞的黏附和定植以预防仔猪腹泻。通过免疫信息学工具对ETEC的黏附素987P和F18的B细胞抗原表位、Th细胞表位、CTL细胞表位进行预测,筛选出优势表位。将优势表位按照3种不同表位排列顺序通过Linker 连接成多表位疫苗,并对其抗原性、致敏性以及三级结构进行预测。结果显示,共筛选出7个优势表位。抗原性试验显示,融合多肽Ⅰ的抗原性为1.069 2;融合多肽Ⅱ的抗原性为1.089 2;融合多肽Ⅲ的抗原性为1.050 7,都具有良好的抗原性。过敏性试验结果显示,融合多肽Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ都无过敏性。三级结构结果显示,3种融合多肽结构表位的暴露性都较好,容易和抗体结合,并且在蛋白分子的构象中都符合要求。此外,还根据不同的规则,排列了3种氨基酸序列,并按照乳酸菌密码子嗜好性,反向翻译为核苷酸序列,插入至pET28a质粒中,分别获得了pET28a-9F1、pET28a-9F2和 pET28a-9F3质粒。

来源：2025年第S1期

《华北农学报》期刊编辑部

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