华北农学报

作者：李海洋, 邵鹏, 杨昌恒, 林亚秋, 王永, 杜站宇, 向华, 黄炼, 朱江江

单位：1 青藏高原动物遗传资源保护与利用四川省重点实验室, 青藏高原动物遗传资源保护与利用教育部重点实验室, 四川 成都 610225；2 四川省青藏高原草食家畜工程技术研究中心, 四川 成都 610225

关键词：山羊,<i>PRKAA1</i>,过表达,克隆,脂质沉积,

基金：四川省科技计划项目(24NSFSC0103); 四川省科技计划项目(2021YFYZ0003); 中央高校基本科研业务费专项基金项目(2023NYXXS094)

为了明确PRKAA1基因在山羊肌内前体脂肪细胞脂质沉积中的作用,通过RT-PCR方法克隆山羊PRKAA1基因的完整CDS区,并开展生物信息学分析;利用双酶切法构建PRKAA1基因过表达载体,并转染山羊肌内前体脂肪细胞。通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测PRKAA1基因在幼年期与青年期背最长肌的表达水平,同时检测前体脂肪细胞在诱导分化过程中PRKAA1基因的表达水平及脂代谢相关基因的表达。采用油红O染色法对PRKAA1基因在脂滴形成过程中的作用进行了观察和研究。研究结果表明,山羊PRKAA1基因的核苷酸序列总长为2 520 bp。其中,5'非翻译区(UTR)包含3 bp,编码区(CDS)长达1 680 bp,而3'非翻译区(UTR)则为837 bp,该基因所编码的蛋白质由559个氨基酸残基组成。山羊PRKAA1基因的亲缘关系分析结果显示,绵羊被确定为其最近的亲缘物种,其次是牛、猪、海豚、人、小鼠、大鼠,而鸡是亲缘关系最远的物种。PRKAA1基因在9月龄背最长肌中的表达水平低于2月龄的,诱导分化前体脂肪细胞过程中均存在表达,且在第6天达到最高。在过表达PRKAA1基因的试验中,山羊肌内前体脂肪细胞脂滴含量显著减少。此外,与脂肪代谢相关的基因,如SREBP1-c、FASN、ACC、AGPAT6、PLIN1、ATGL、ACOX1表达均显著下调,且其变化具有统计学意义。然而,DGAT1、DGAT2、LPL和HSL这几个基因的表达水平并未表现出显著变化。这些结果表明,PRKAA1基因的过表达可能通过多种代谢途径影响脂质沉积,具体而言,它能够抑制脂肪酸的从头合成、降低脂肪的合成速率,并提高脂肪的降解速率。这些机制共同作用,从而抑制山羊肌内前体脂肪细胞中的脂质沉积。

来源：2025年第5期

《华北农学报》期刊编辑部

查看华北农学报杂志2025年第5期