华北农学报

作者：王煜轩, 杨植, 刘昊阳, 王兴海, 杨富琳, 芦烘德, 何至远, 董虹

单位：1 北京农学院,兽医学(中医药)北京市重点实验室,北京 102206；2 北京农学院 动物科学技术学院,北京 102206

关键词：虎杖水提取物,PEDV,IPEC-J2,细胞适应性,体外抑制,

基金：“十四五”重点研发计划项目(2022YFD1801103); 国家自然科学基金项目(32373058); 国家自然科学基金项目(32302916); 市属高校分类发展-都市农林特色教师队伍建设项目(11000024T000002961733); 北京市教育委员会科学研究计划项目(KM202310020006); 北京市教育委员会科技计划一般项目(KM202410020007); 北京农学院青年教师科研创新能力提升计划资助项目(QJKC-2023011); 北京农学院科技创新“火花行动”支持计划项

为探究猪流行性腹泻病毒(PEDV)在猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)中的繁殖适应性,并评估虎杖水提取物对其体外抑制作用,通过细胞毒性试验和Western Blot试验,评估不同胰酶浓度、不同时间对IPEC-J2细胞活性以及PEDV N蛋白在细胞内表达的影响;再通过TCID50、实时荧光定量PCR和Western Blot等方法检测病毒滴度、PEDV N基因转录水平及N蛋白的表达量;使用CCK-8法检测虎杖水提取物对IPEC-J2细胞增殖活力的影响;进一步通过实时荧光定量PCR和Western Blot试验,检测虎杖水提取物对PEDV N基因和N蛋白表达的抑制作用,以及探究虎杖水提取物对PEDV生命周期各个阶段的影响。结果表明,当胰酶浓度为2 μg/mL时,胰酶对细胞无影响,此时PEDV展示出最佳的繁殖适应性,且36 h后达到最高毒力值;虎杖水提取物浓度低于100 μg/mL时在12 h,24 h无细胞毒性。虎杖水提取物在All-treatment Co-treatment、Post-treatment 3种加药方式下显著抑制N基因表达,并呈剂量依赖显著抑制PEDV N基因mRNA和N蛋白的表达;虎杖水提取物主要在病毒生命周期中复制增殖阶段对PEDV N基因有显著抑制效果,在其他阶段无明显抑制作用。综上,2 μg/mL胰酶浓度对PEDV繁殖适应性最佳,并且虎杖水提取物在体外有显著的抑制PEDV效果,主要作用于PEDV生命周期的复制增殖阶段。

来源：2025年第3期

《华北农学报》期刊编辑部

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