华北农学报

作者：殷冬冬, 朱星星, 兰梦蝶, 彭梦玲, 尹磊, 戴银, 沈学怀, 王洁茹, 赵瑞宏, 潘孝成

单位：1 安徽省农业科学院 畜牧兽医研究所,安徽省畜禽疫病研究中心,安徽 合肥 230001；2 安徽省畜禽产品重点实验室,安徽 合肥 230001；3 安徽农业大学 动物科技学院,安徽 合肥 230031；4 宁国市动物卫生监督所,安徽 宁国 242300

关键词：新型鹅星状病毒,VP27-VP34 融合蛋白,分离鉴定,原核表达,多克隆抗体,

基金：安徽省农业科学院科研平台项目(2024YL016); 安徽省现代农业产业技术体系(AHCYJXTX-05-13)

为分析安徽六安地区新型鹅星状病毒(GAstV)的变异情况并表达其VP27-VP34蛋白,从六安某养殖场采集鹅痛风病料,经RT-PCR检测为阳性后,首先对鹅胚传代培养分离病毒,其次对分离毒株进行动物回归试验、全基因组扩增测序及遗传进化分析;随后,将分离株的VP27-VP34序列克隆至pCold-TF载体进行诱导表达,并将纯化后的重组蛋白免疫6 周龄雌性 BALB/c 小鼠制备多克隆抗体。通过间接免疫荧光(IFA)检测多克隆抗体特异性,利用琼脂扩散法检测血清抗体效价。结果表明,从临床病料样本中分离到 1 株鹅星状病毒,命名为 AH-2021 株。动物回归试验可见雏鹅心脏、肝脏表面尿酸盐沉积明显,肾脏发白、肿胀。遗传进化结果显示, AH-2021 株属于GAstV-1,与GenBank中的其他GAstV-1相似性为98.0%~99.0%。重组表达载体pCold-TF-VP27-VP34经 IPTG 诱导获得了目的蛋白,SDS-PAGE显示,重组蛋白分子质量约为110 ku,主要以上清形式存在。IFA试验结果显示,制备的多克隆抗体能够特异性识别新型鹅星状病毒,琼脂扩散结果显示,抗体效价可达 1:16。综上所述,从临床痛风雏鹅中分离鉴定到 1 株新型鹅星状病毒 AH-2021 株,动物回归试验表明,新型鹅星状病毒是导致雏鹅痛风的病原,制备了VP27-VP34 融合蛋白的多克隆抗体。

来源：2025年第2期

《华北农学报》期刊编辑部

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