华北农学报

作者：桑莹莹, 李珊珊, 鲍薇, 徐东, 张雪, 赵艳

单位：1 齐齐哈尔大学 生命科学与农林学院,黑龙江 齐齐哈尔 161006；2 吉林吉农高新技术发展股份有限公司,吉林 公主岭 136100

关键词：大豆,P34蛋白,启动子,生物信息学分析,转基因烟草,

基金：国家自然科学基金青年科学基金项目(32101694); 黑龙江省植物性食品加工技术优势特色学科项目(YSTSXK202303)

大豆P34蛋白主要存在于种子中,其上游启动子很可能具有调控下游基因在种子中高表达的特性。为进一步研究大豆P34蛋白基因的组织表达模式及其启动子的调控活性,通过qRT-PCR方法检测大豆P34蛋白基因在大豆不同组织中的表达情况;克隆大豆P34蛋白基因5'端上游序列(GmP34P),生物信息学分析其转录起始位点和顺式元件;构建表达载体,利用农杆菌介导的叶盘法转化烟草,检测转基因烟草中GUS的表达。结果表明,P34蛋白基因在大豆种子中的表达量极显著高于根、茎、叶和花的表达量;克隆获得GmP34P序列长度为1 380 bp,预测分析表明,该序列的转录起始位点为第1 342位上的碱基A,序列中含有多种与种子高表达相关的顺式作用元件,如RY element、Skn-1 motif、2S seed protbanapa等;获得含有GmP34P启动子驱动GUS基因的植物表达载体pCAM-GmP34P;通过潮霉素、PCR及RT-PCR筛选阳性转基因植株;对pCAM-GmP34P阳性转基因烟草植株,进行qRT-PCR检测,结果显示,相对于其他组织,GUS基因在转基因烟草种子中的表达量达到极显著差异;GUS组织化学染色结果显示,GmP34P启动子能够调控下游GUS基因在种子中高表达。

来源：2025年第1期

《华北农学报》期刊编辑部

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