华北农学报

作者：浦霞, 吕春桃, 张宇, 徐慧妮, 余迪求, 孙旭东

单位：1 云南大学 生态与环境学院,云南 昆明 650091；2 中国科学院 昆明植物研究所,云南 昆明 650201；3 昆明理工大学 生命科学与技术学院,云南 昆明 650500

关键词：拟南芥,<i>NBS1</i>,可变剪切,DNA损伤修复,功能分析,

基金：云南省研究专项-重大项目(202401BC070001); 国家自然科学基金项目(32370405)

DNA损伤会对植物的生长发育造成严重的影响,NBS1是参与损伤修复的重要基因,为研究NBS1与其可变剪切体NBS1-3之间的功能差异。根据NBS1和NBS1-3基因序列分别设计特异性引物,以野生型拟南芥叶片RNA反转录得到的cDNA第一链为模板,克隆NBS1和NBS1-3,对2个基因序列和蛋白质三维结构进行分析。同时,创制了NBS1、NBS1-3过表达株系,获得突变体nbs1纯合株系,并检测NBS1基因在NBS1及NBS1-3过表达植株的相对表达量。为进一步阐明NBS1与可变剪接体NBS1-3之间的功能差异,用0.6 mmol/L甲基黄酸甲酯(MMS)对野生型、nbs1突变体和过表达植株进行处理,观察损伤面积。定量检测结果显示,NBS1基因在NBS1及NBS1-3过表达植株的表达量均高于野生型。根尖PI染色结果表明,0.6 mmol/L MMS处理后,nbs1突变体植株相对损伤面积最大,而NBS1-3过表达植株相对损伤面积最小,其次依次为NBS1过表达植株和野生型。因此,在DNA损伤修复方面,NBS1-3可能比NBS1发挥更大的作用。

来源：2025年第1期

《华北农学报》期刊编辑部

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