华北农学报

作者：刘永宁, 单乙戈, 潘晨帆, 刘倩琳, 李翌琳, 段思彰, 安健, 张建军

单位：北京农学院 动物科学技术学院,北京 102206

关键词：柔嫩艾美耳球虫,AMA1,原核表达,免疫效果,

基金：北京农学院学位与研究生教育改革与发展项目(2022YJS029); 北京市科委创新劵项目(20190629)

为探究柔嫩艾美耳球虫顶膜抗原-1(AMA1)对感染柔嫩艾美耳球虫雏鸡的免疫保护效果,将AMA1基因扩增产物连接到表达载体pET-32a(+)上构建重组质粒pET-32a(+)-AMA1,并转入大肠杆菌BL21(DE3)来表达重组蛋白。将108只雏鸡随机分为6组,每组3个重复,每个重复6羽,包括不免疫不攻虫组(阴性组)、不免疫攻虫组(阳性组)、弗氏佐剂对照组及12.5,25.0,50.0 μg rEtAMA1免疫组,分别于14,21日龄肌肉注射不同浓度的重组蛋白,28日龄口服感染5×104个柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊,35日龄处死试验鸡,以体增质量、盲肠病变评分、卵囊产量、免疫器官指数、细胞因子及抗体水平来评价重组AMA1蛋白的免疫保护效果。结果显示,各组间的平均增质量差异不显著;25.0 μg及50.0 μg rEtAMA1组的盲肠病变计分较阳性组分别显著降低了53%和41%;12.5,25.0,50.0 μg rEtAMA1组的克粪便卵囊数量(OPG)分别较阳性组显著减少16%,27%,54%;50.0 μg rEtAMA1组的法氏囊指数较阳性组显著提高27%;25.0,50.0 μg rEtAMA1组的胸腺指数均显著高于阳性组,分别增加了25%,22%;各组的脾脏指数无显著差异;在二免后7 d,12.5 μg和25.0 μg rEtAMA1组的细胞因子IL-2和IFN-γ含量均显著高于阴性组,50.0 μg rEtAMA1组血清总IgG含量较阴性组显著增加47%,且二免后含量明显高于首免后。综上,重组AMA1蛋白能够减轻盲肠病变,减少球虫卵囊产量和促进免疫器官发育,提高血清细胞因子和抗体水平,对感染柔嫩艾美耳球虫雏鸡具有一定的免疫保护效果。

来源：2025年第1期

《华北农学报》期刊编辑部

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