华北农学报

作者：徐红梅, 海欣怡, 李悦悦, 李巧, 马梓峰, 熊燕, 熊显荣, 兰道亮, 李键, 付伟

单位：1 西南民族大学 青藏高原动物遗传资源保护与利用教育部重点实验室,四川 成都 610041；2 西南民族大学 青藏高原动物遗传资源保护与利用四川省重点实验室,四川 成都 610041；3 西南民族大学 动物科学国家民委重点实验室,四川 成都 610041

关键词：牦牛,胎儿成纤维细胞,分离培养,细胞活力,免疫荧光染色,

基金：国家重点研发计划项目(2021YFD1600200); 四川省科技计划项目(2024YFTX0019); 甘孜州“校州合作”项目(横20240054)

旨在建立牦牛肌肉和皮肤成纤维细胞系,并分析比较两者的形态、生长、标志基因和蛋白的差异,为更好地了解和研究牦牛相关特性提供材料。首先,从妊娠3个月的牦牛胎儿分离皮肤和肌肉组织块,分别采用组织块法和酶解法培养其原代细胞,观察其生长状态和形态特点;之后,利用CCK8法检测皮肤成纤维细胞和肌肉成纤维细胞的增殖活力,并对2种细胞进行免疫荧光染色分析;最后,利用RT-qPCR分析2种细胞中成纤维细胞标志基因的表达。结果显示,酶解法比组织块法更容易获得胎牦牛皮肤和肌肉成纤维细胞,胎牦牛皮肤成纤维细胞的活力显著高于肌肉成纤维细胞(P<0.05),且皮肤成纤维细胞中标志蛋白VIMENTIN的荧光强度显著高于肌肉成纤维细胞,但二者组蛋白修饰H3K27me3的差异不显著;VIMENTIN和S100A4基因在皮肤成纤维细胞中显著高表达,而FAP和SMA基因在肌肉成纤维细胞中显著高表达,与免疫荧光染色结果一致。综上,建立了牦牛胎儿皮肤和肌肉成纤维细胞系,并通过CCK8、免疫荧光染色和RT-qPCR等方法比较了2种细胞的生理特性。

来源：2024年第S1期

《华北农学报》期刊编辑部

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