华北农学报

作者：胡莲, 刘益丽, 赵迪, 王泽宁, 江明锋

单位：1 西南民族大学,青藏高原动物遗传资源保护与利用教育部和四川省重点试验室,四川 成都 610041；2 西南民族大学 畜牧兽医学院,四川 成都 610041

关键词：牦牛,<i>MFSD4A</i>,基因克隆,互作蛋白分析,亚细胞定位,

基金：四川省科技计划项目(2021YFYZ0001); 西南民族大学研究生创新型科研项目(ZD2022490); 四川省科技计划项目(2023YFQ0076); 四川省自然科学基金(2022NSFSC1665); 那曲市科技局重点研发项目(NQKJ-2023-07)

旨在克隆麦洼牦牛MFSD4A基因序列并阐明其在不同组织中的表达模式,分析MFSD4A互作蛋白mRNA表达水平及其相关性,确定MFSD4A蛋白的亚细胞定位,为后续MFSD4A在牦牛睾丸生长发育调控研究中提供理论依据。以4头健康麦洼牦牛的心、肝、脾、肺、肾、肌肉、脂肪、臀肌、背部肌肉、睾丸、结肠组织作试验材料,用 RT-PCR技术克隆麦洼牦牛MFSD4A 基因CDS序列并对其进行生物信息学分析;利用RT-qPCR技术检测MFSD4A基因在心、肝、脾、肺、肾、臀肌、背部肌肉、脂肪、睾丸、淋巴等10个组织中的表达及与其互作蛋白的相关性;构建pEGFP-MFSD4A融合质粒转染牛肾细胞系(MDBK)探究MFSD4A蛋白的亚细胞定位情况。结果表明,麦洼牦牛MFSD4A基因 CDS 区全长为1 530 bp,编码509个氨基酸,理论等电点(pI)为8.66,具有12个跨膜结构域,属于碱性跨膜蛋白;RT-qPCR结果显示,MFSD4A mRMA在麦洼牦牛各组织中差异表达,且在睾丸组织中表达量最高,与MFSD9、CBY1、INHBA、UNC93A、SVOP、ID1在睾丸组织中的表达量呈极显著正相关,推测MFSD4A基因可能与牦牛睾丸的生长发育调控有关;构建 pEGFP-MFSD4A 融合质粒转染牛肾细胞(MDBK)后的荧光定位显示该蛋白主要定位于细胞核。

来源：2024年第2期

《华北农学报》期刊编辑部

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