华北农学报

作者：岳炳霖, 杨友抓拉母, 冉宏标, 王会, 蔡欣, 王嘉博, 柴志欣, 彭巍, 舒适, 付长其, 王国文, 钟金城

单位：1 西南民族大学 青藏高原动物遗传资源保护与利用四川省、教育部重点实验室,四川 成都 610041；2 青海大学 青海省畜牧兽医科学院,青海 西宁 810016

关键词：牛circMYH8,骨骼肌,细胞增殖,

基金：西南民族大学中央高校基本科研业务费专项资金项目(ZYN2022087); 青海省科技计划项目(2022-NK-110); 国家肉牛牦牛产业技术体系建设项目(CARS-37); 国家自然科学基金(31902153); 四川省科技计划项目(2021YJ0266)

旨在鉴定牛circMYH8以及探究其对牛肌原代细胞增殖的调控作用。设计合成circMYH8的divergent primer及convergent primer 2组引物,分别以牛背最长肌cDNA、RNase R处理的牛背最长肌cDNA以及牛背最长肌gDNA为模板进行PCR扩增,通过测序及琼脂糖凝胶电泳进行环状RNA鉴定;对circMYH8进行不同发育时期骨骼肌RT-qPCR分析、核质分离试验以及RNase R耐受性试验;构建及合成circMYH8的过表达载体及干扰片段,并转染至牛肌原代细胞中,通过RT-qPCR、Western Blot、EdU、流式细胞术等手段探究了circMYH8对牛肌原代细胞增殖表型的影响。结果表明,测序及琼脂糖凝胶电泳证实circMYH8为环状RNA;RT-qPCR分析显示,circMYH8在牛骨骼肌发育早期高表达,核质分离试验结果显示,circMYH8在细胞核和细胞质中都有表达,RNase R耐受性试验表明,circMYH8的稳定性高于其线性转录物;过表达circMYH8抑制了增殖标志基因的表达,EdU活性降低,而抑制circMYH8促进了增殖标志基因的表达,EdU活性上升,S期细胞比例上升。结果表明,牛circMYH8能显著抑制牛肌原代细胞增殖。

来源：2023年第4期

《华北农学报》期刊编辑部

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