华北农学报

作者：贾志强, 许云玉, 高雪, 陶宏征, 陈增敏, 刘雅婷, 李永忠

单位：1.云南农业大学 植物保护学院,云南 昆明 650201；2.云南农业大学 农学与生物技术学院,云南 昆明 650201；3.红河学院 生命科学与技术学院,云南 蒙自 661199；4.云南农业大学 烟草学院,云南 昆明 650201

关键词：辣椒,<i>CaWRKY30</i>基因克隆,生物信息学,番茄斑萎病毒,表达分析,

基金：国家自然科学基金项目(31471828); 国家自然科学基金项目(31260451); 云南省重点项目(2018FA019)

为研究辣椒CaWRKY30转录因子与番茄斑萎病毒互作的响应机制,以辣椒湘研11为试验材料,通过RNA提取、RT-PCR、切胶纯化及克隆等试验获得CaWRKY30编码序列。生物信息学分析结果表明,CaWRKY30全长1 122 bp,编码373个氨基酸,该基因编码的蛋白含有1个WRKY保守结构域和1个C2H2结构域,属于典型的Ⅱ(e)亚家族成员。系统发育分析表明,与马铃薯StWRKY22氨基酸序列的亲缘关系最近。本氏烟叶片亚细胞定位试验发现,CaWRKY30在本氏烟幼苗中定位于细胞核和细胞膜,并且导致细胞膜加厚。实时荧光定量PCR分析结果表明,观察番茄斑萎病毒机械摩擦接种辣椒后的病毒积累量,发现病毒积累量在接种1~14 d逐渐上升,在接种后14 d处于最大值,接种14 d后病毒积累量逐渐下降;同时,CaWRKY30受番茄斑萎病毒接种后诱导,在接种病毒1~14 d CaWRKY30表达量上调,14 d达到峰值,14 d以后表达量逐渐下降。综上,获得了CaWKRY30转录因子基因序列,该转录因子定位于细胞核和细胞膜,并初步阐述了辣椒CaWRKY30转录因子在番茄斑萎病毒胁迫下的表达趋势。

来源：2022年第3期

《华北农学报》期刊编辑部

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