华北农学报

作者：冉黎, 吕锦诗, 张浩, 王永, 朱江江, 李艳艳, 孟庆勇, 林亚秋

单位：1.青藏高原动物遗传资源保护与利用教育部、四川省重点实验室,四川 成都 610041；2.西南民族大学 畜牧兽医学院,四川 成都 610041；3.中国农业大学 生物学院,农业生物技术国家重点实验室,北京 100193

关键词：山羊,<i>APOC3</i>基因,肌内脂肪细胞,过表达,细胞分化,

基金：国家自然科学基金项目(32072723); 四川省重点研发项目(2021YFYZ0003); 中央高校基本科研业务费专项基金项目(3300221815); 农业生物技术国家重点实验室2021年度开放课题(2021SKLAB6-1)

为了明确APOC3基因在山羊肌内脂肪细胞分化中的作用,采用RT-PCR技术克隆山羊APOC3基因序列,并通过在线软件进行生物信息学分析;利用实时荧光定量PCR(qPCR)技术检测山羊APOC3基因在各组织和不同分化阶段的肌内脂肪细胞中的表达规律;在利用双酶切法构建山羊APOC3过表达载体的基础上,利用油红O染色确定山羊APOC3基因过表达对肌内脂肪细胞脂滴聚集的影响,同时利用qPCR方法检测成脂分化标志基因mRNA的相对表达水平,进而明确其可能发挥作用的途径。结果表明,获得山羊APOC3的ORF区长294 bp,编码97个氨基酸,功能结构域区在第23-88个氨基酸处。山羊APOC3在心脏、肝脏、脾脏等14个组织中均有表达,且在肝脏中的表达量最高;山羊APOC3在诱导分化48 h表达量最高,极显著高于分化前;过表达山羊APOC3后肌内脂肪细胞中脂滴积聚增多,成脂分化标志基因SREBP1和CEBPβ的相对表达水平极显著上调,PPARγ的相对表达水平显著上调,而Pref-1相对表达水平显著下调。结果表明,山羊APOC3可能通过上调SREBP1、CEBPβ、PPARγ及下调Pref-1来发挥作用促进肌内脂肪细胞的分化。

来源：2022年第3期

《华北农学报》期刊编辑部

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