华北农学报

作者：李君, 闫志浩, 贾万里, 许蒙蒙, 张景锋, 徐秋良, 韩浩园, 权凯

单位：1.河南牧业经济学院 动物科技学院,河南 郑州 450046；2.河南省反刍动物营养与饲料资源开发国际联合实验室,河南 郑州 450046；3.西峡县农业农村局,河南 西峡 474550

关键词：奶山羊,ATGL,启动子,核心区域,转录活性,

基金：河南牧业经济学院博士科研启动资金项目(2020HNUAHEDF024)

脂肪甘油三酯水解酶(ATGL)是脂肪水解过程中的主要限速酶,是调控细胞中甘油三酯和脂肪酸之间平衡的关键因子。为了分析奶山羊ATGL基因启动子的结构及转录调控机制,以奶山羊全血DNA为模板,通过PCR技术扩增出ATGL基因5'侧翼序列并进行生物信息学分析;构建了5个不同长度的启动子缺失片段报告基因载体,通过转染奶山羊乳腺上皮细胞并检测其活性,确定其核心区域;分别用PPARG激动剂罗格列酮和SREBP1激动剂T0901317处理细胞,检测其对ATGL启动子活性的影响。结果表明,克隆得到奶山羊ATGL基因5'侧翼序列2 721 bp,包含转录起始位点上游2 024 bp。经在线软件分析发现,ATGL启动子含有真核生物启动子元件TATA-box和CpG岛;对转录因子结合位点预测发现,其上含有FOXO、SREBF1、PPARG、C/EBPα和E2F1等结合位点。启动子活性分析结果表明,ATGL启动子核心区域位于转录起始位点上游-256—+1位,且在-527—-256 位存在负调控元件。用罗格列酮和T0901317处理细胞后发现,二者均能显著上调ATGL启动子活性,且罗格列酮作用的区域为-527—-256 位,T0901317在-882—-527 位发挥作用,表明PPARG和SREBP1调控ATGL启动子活性。

来源：2022年第2期

《华北农学报》期刊编辑部

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