华北农学报

作者：张锦锦, 王云平, 王筱, 张书兴, 王学敏

单位：1. 中国农业科学院 北京畜牧兽医研究所, 北京 100193;；2. 北京汇诚绿洲园林工程有限公司, 北京 100125

关键词：紫花苜蓿,MsWRKY33,多克隆抗体,蛋白免疫印记,盐胁迫,

基金：国家自然科学基金面上项目（31872410）；财政部和农业农村部：国家现代农业产业技术体系（CARS-34）；中国农业科学院科技创新工程（ASTIP-IAS10）

为在蛋白水平上探索紫花苜蓿MsWRKY33在抗逆性上的生物学功能，以紫花苜蓿品种中苜1号为材料，克隆了MsWRKY33抗原序列并对其性质和功能进行初步分析。对MsWRKY33蛋白的结构和特性进行生物信息学分析表明，MsWRKY33蛋白全长511 aa，主要由无规则卷曲和延伸链结构组成，不具有信号肽，是一个亲水性蛋白，免疫原性预测结果表明该蛋白免疫原性较强。结合序列的特异性选取适宜区段247～457 aa，利用该区段经蛋白纯化、免疫等步骤制备了MsWRKY33多克隆抗体。后续又采用Western Blotting的方法，对4种非生物胁迫（高盐、冷、PEG、ABA）下MsWRKY33蛋白的表达情况进行分析，发现4种胁迫均能诱导MsWRKY33蛋白表达增强，其中盐胁迫的诱导表达丰度最高，表明MsWRKY33在调控植物的高盐逆境响应中可能具有重要作用。试验结果为深入探索紫花苜蓿MsWRKY33基因功能及其对非生物逆境的抗性调控机制提供依据。

来源：2021年第6期

《华北农学报》期刊编辑部

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