华北农学报

作者：王海波, 李芙蓉, 杨金翠, 高永, 郭俊云

单位：1. 曲靖师范学院 生物资源与食品工程学院, 云南 曲靖 655011;；2. 曲靖师范学院 云南省高校云贵高原动植物遗传多样性及生态适应性进化重点实验室, 云南 曲靖 655011

关键词：小桐子,磷酸葡萄糖变位酶,基因克隆,原核表达,

基金：云南省地方本科高校（部分）基础研究联合专项（202001BA070001-003）；云南省大学生创新创业训练计划项目（202010684038）；国家自然科学基金（31460179；31760103）；国家级大学生创新创业训练计划项目（201810684018）

为了探究磷酸葡萄糖变位酶（PGM）在植物蔗糖与淀粉代谢中的重要作用，基于同源序列比对的方法，在小桐子基因组中鉴定到1个细胞质型PGM基因（命名为JccPGM）与1个叶绿体型PGM基因（命名为JcpPGM），利用qRT-PCR方法检测JccPGM与JcpPGM基因在小桐子不同器官与低温条件下的表达特性，同时，构建了pGEX-4T-1-JccPGM与pGEX-4T-1-JcpPGM原核表达载体并在大肠杆菌BL21（DE3）中进行了表达分析。结果表明：两者分别编码582，637 aa的蛋白质。聚类分析表明，小桐子pPGM在其N端包含叶绿体定位信号肽，而cPGM较pPGM多4段肽链序列-108VGVDGS113-、-183SGPE186-、-283GKSNSE288-、-470SLGEVN475-。qRT-PCR表达分析显示，小桐子cPGM与pPGM基因都在叶片中高表达，而在根与种子中表达量较低。通过BL21（DE3）诱导表达，分别得到90.7，97.0 ku的蛋白条带，与理论融合蛋白的分子量一致。综上所述，本研究为开展小桐子cPGM与pPGM基因表达蛋白的功能分析以及其在蔗糖与淀粉积累、逆境应答中的机制研究奠定了基础。

来源：2021年第4期

《华北农学报》期刊编辑部

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