华北农学报

作者：张昆丽, 林本夫, 席振军, 杨冬霞, 卞志标, 宋帅, 蒋智勇, 蔡汝健, 李春玲

单位：1. 广东省农业科学院 动物卫生研究所, 广东省畜禽疫病防治研究重点实验室, 农业农村部兽用药物与诊断技术广东科学观测实验站, 广东 广州 510640;；2. 广州市花都区动物卫生监督所, 广东 广州 510800

关键词：猪链球菌,谷氨酸脱氢酶基因,纳米PCR,临床诊断,

基金：国家“十三五”重点计划专项课题（2016YFD0500709）；科技创新战略专项资金（高水平农科院建设）（R2019YJ-YB2005；R2020QD-047）；广州市科技计划项目（202102020385）

为了建立一种高效、灵敏的猪链球菌（SS）检测方法，针对SS的谷氨酸脱氢酶基因（gdh）合成特异性引物，通过优化退火温度与引物浓度，经特异性、敏感性、重复性以及临床样品检测，建立了SS的纳米PCR检测方法。特异性试验结果显示，该方法仅能从SS的基因组序列中扩增得到687 bp的特异性序列，与猪胸膜肺炎放线杆菌、副猪嗜血杆菌、猪大肠杆菌、沙门氏菌、葡萄球菌无交叉反应，且能同时识别1、2、7和9型4个目前流行的SS主要血清型，满足临床上多血清型SS感染检测的需要；敏感性试验结果显示，该方法对SS的最低检测下限为10 cfu/mL，与普通PCR方法相比，灵敏度提高了100倍；重复性试验表明，该方法检测效果稳定，重复性较好。用该方法和普通PCR对临床上收集的44份疑似SS感染样品进行检测，阳性率分别为72.7%（32/44），54.5%（24/44），表明该纳米PCR方法具有灵敏度高，特异性好等优点。综上，本研究建立的SS纳米PCR检测方法，能够准确、高效检测SS，为猪链球菌病的临床诊断和流行病学调查提供了技术支持。

来源：2021年第4期

《华北农学报》期刊编辑部

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