华北农学报

作者：霍文韬, 周婷, 余越, 杨清澜, 常馨丹, 李键, 熊显荣, 熊燕

单位：1. 西南民族大学 畜牧兽医学院, 四川 成都 610041;；2. 青藏高原动物遗传资源保护与利用教育部重点实验室, 四川 成都 610041

关键词：金川牦牛,<i>CIDEA</i>基因,基因克隆,时序表达,脂肪组织,脂肪细胞,

基金：四川省科技计划项目（2019YJ0258）；国家自然科学基金项目（31902154）；西南民族大学大学生创新创业训练计划项目（202010656030）

旨在克隆牦牛诱导细胞凋亡DNA片段化45样效应因子A（CIDEA）基因序列、分析其生物学特性及检测CIDEA基因在牦牛不同组织及脂肪细胞分化中的表达模式。以金川牦牛皮下脂肪组织的cDNA为模板，采用PCR技术克隆CIDEA基因的CDS序列（Coding sequence），对CDS区进行相关的生物信息学分析；设计特异引物，检测该基因在金川牦牛肺脏、心脏、肾脏、脂肪等组织的表达情况；同时分离原代前体脂肪细胞，分析CIDEA基因在脂肪细胞分化过程中的表达趋势。结果表明，金川牦牛CIDEA基因的序列长度为696 bp，其中CDS序列为684 bp，编码227个氨基酸；金川牦牛CIDEA基因与普通牛的同源性最高，核苷酸序列同源性为94.14%，氨基酸序列同源性为99.54%，与鸡的同源性最低，核苷酸序列同源性仅为63.38%，氨基酸序列同源性仅为59.05%，利用MEGA 5.0软件构建进化树显示金川牦牛与牛的亲缘关系最近，与鸡的亲缘关系最远。蛋白理化性质分析结果表明，CIDEA蛋白是一个不稳定的碱性亲水蛋白，不存在跨膜结构与信号肽；二级结构预测显示CIDEA蛋白中α螺旋占33.92%，无规则卷曲占51.98%。实时荧光定量PCR结果表明，CIDEA基因在金川牦牛脂肪组织中表达量最高，肺脏中表达量最低；在金川牦牛脂肪细胞分化过程中呈现上升的趋势。由此可推测金川牦牛CIDEA基因可能参与牦牛脂肪细胞分化与脂肪沉积。

来源：2021年第4期

《华北农学报》期刊编辑部

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