华北农学报

作者：杜想想, 赵亚帆, 赵晨云, 赵帅兵, 李源, 程远, 赵全志, 杜彦修, 孙红正, 孙虎威, 彭廷

单位：河南粮食作物协同创新中心, 河南省水稻生物学重点实验室, 河南农业大学, 河南 郑州 450046

关键词：水稻,<i>OsARF12</i>,CRISPR/Cas9,基因编辑,株高,

基金：国家自然科学基金项目（31871554）；河南省高校科技创新人才支持计划（21HASTIT037）；河南省青年人才托举工程项目（2019HYTP024）；河南省水稻产业技术体系项目（S2012-04-G02）；河南农业大学高层次人才——拔尖人才支持计划项目

为研究水稻生长素响应因子OsARF12在水稻生长发育中的作用，通过CRISPR/Cas9基因编辑技术，设计OsARF12 2个不同外显子突变靶点，化学合成包括突变靶点的特异性序列，并与中间载体sgRNA连接进而与Cas9终载体重组获得OsARF12 2个不同突变靶点的表达载体。选取测序成功的单一克隆，利用农杆菌介导法导入粳稻品种日本晴，获得转基因植株，并结合测序结果分析突变单株的突变类型，T1突变体KO-ARF12-1有3种纯合突变、2种双等位突变，共5种突变类型；KO-ARF12-2有6种纯合突变、4种双等位突变和1种杂合突变，共11种突变类型。挑选突变类型为缺失1 nt、缺失4 nt、缺失7 nt和缺失2 nt插入1 nt、缺失5 nt的株系作为研究对象，荧光定量PCR鉴定结果表明，OsARF12在突变体中的表达量较野生型极显著下降（P<0.01）。在正常大田生长条件下，2种突变体不同突变类型株系与野生型相比，株高显著降低，降幅为13.15%~18.39%；第1，2茎节间长度无显著差异，第3，4茎节间长度显著降低，降幅为21.91%，23.46%。利用CRISPR/Cas9创制的OsARF12突变体，对水稻节间延伸及株高具有一定调节作用，对于完善水稻生长素响应因子的分子调控机制具有重要意义。

来源：2021年第3期

《华北农学报》期刊编辑部

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