华北农学报

作者：谢昆, 李密杰, 蒋成砚, 鲁海菊, 孔琼, 何超, 沈登荣

单位：1. 红河学院 生命科学与技术学院, 云南 蒙自 661199;；2. 云南省高校滇南特色生物资源研究与利用重点实验室, 云南 蒙自 661199

关键词：Omiganan,抗菌肽,克隆,表达,抑菌活性,

基金：国家自然科学基金项目（31760638）；红河学院生物学重点建设学科资助（SZ1520）

为获得Omiganan抗菌肽并研究其抑菌活性，根据Omiganan抗菌肽的一级结构（NH2-ILRWPWWPWRRK-COOH），通过基因工程技术，参考大肠杆菌和毕赤酵母偏爱密码子原则，分别获得Omiganan核苷酸序列，再以Omiganan核苷酸序列为模板，设计特异性引物，通过PCR技术扩增Omiganan基因，分别与pET32a表达载体和pPIC9K连接构建pET32a-Omiganan原核表达载体和pPIC9K-Omiganan毕赤酵母表达载体，对含pET32a-Omiganan重组质粒的菌株分别采用IPTG 25℃，IPTG 37℃ 2种温度和自诱导方式表达获得Omiganan重组蛋白，对含pPIC9K-Omiganan毕赤酵母菌株采用1%甲醇诱导获得Omiganan抗菌肽。结果表明，自诱导14 h后Omiganan重组蛋白的表达量最高，IPTG 25℃，IPTG 37℃ 2种温度皆能诱导Omiganan重组蛋白的表达，但两者之间无显著差异。通过毕赤酵母表达的Omiganan抗菌肽对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均具有很强的抑菌活性。

来源：2021年第2期

《华北农学报》期刊编辑部

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