华北农学报

作者：岳润清, 刘璐, 铁双贵, 徐心志, 陈娜娜

单位：河南省农业科学院 粮食作物研究所, 河南 郑州 450002

关键词：转基因玉米,<i>Cry1Ab-t</i>基因,农杆菌介导,分子鉴定,玉米螟,抗虫鉴定,

基金：转基因生物新品种培育重大专项（SQ2019ZD080072）；河南省农业科学院杰出青年科技基金（2020JQ01）

为了培育优良的抗虫玉米自交系，通过农杆菌介导的方法，将含有自主改造合成的抗虫基因Cry1Ab-t的植物表达载体pCAMBIA3300m导入玉米杂交种HiⅡ基因组中，通过双丙氨磷筛选、PCR检测获得阳性转基因植株，采用RT-PCR、试纸条、ELISA方法检测外源基因的表达情况，并进行抗虫性鉴定。结果表明，用双丙氨磷筛选后，获得了116株转基因玉米植株；经目的基因Cry1Ab-t和标记基因Bar的PCR检测，获得转基因阳性植株82株。选取长势好的转基因材料YA108进行RT-PCR、Bt-Cry1Ab/Ac试纸条和ELISA分析发现，转基因玉米YA108的Cry1Ab-t基因在转录、翻译水平上均表达。玉米花丝接虫试验表明，非转基因玉米花丝虫食严重，表现为高感玉米螟；而转基因玉米YA108花丝抗虫效果明显，均达到高抗水平，抗虫性表现稳定；吐丝期接虫试验表明，非转基因玉米接虫后期被咬食严重，茎秆多处有蛀孔，伤口处大多有霉菌，而转基因玉米YA108没有受到危害。田间接虫后，无论叶片和花丝，转Cry1Ab-t基因抗虫玉米材料YA108对亚洲玉米螟都具有非常好的抗性，能够短时间杀灭玉米螟幼虫，并极大程度减少了由于虫害引起的霉变。室内和田间接虫鉴定结果表明，转基因玉米YA108对亚洲玉米螟有较强的杀虫效果，田间抗虫等级为1级，抗性水平为高抗。

来源：2021年第2期

《华北农学报》期刊编辑部

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