华北农学报

作者：杨柳青, 殷实, 秦文昌, 袁钰洁, 李键

单位：1. 西南民族大学 青藏高原动物遗传资源保护与利用教育部重点实验室, 四川 成都 610041;；2. 西南民族大学 畜牧兽医学院, 四川 成都 610041;；3. 西南民族大学 青藏高原动物遗传资源保护与利用四川省重点实验室, 四川 成都 610041;；4. 西南民族大学 现代生物技术国家民委重点实验室, 四川 成都 610041

关键词：牦牛,<i>SIRT7</i>,克隆,组织表达谱,卵巢,

基金：中央高校基本科研业务费专项基金项目（2020PTJS15003）

旨在克隆牦牛Sirtuin7（SIRT7）基因，预测其蛋白结构和功能，并检测其mRNA在牦牛各组织和不同发情时期卵巢中的表达。采集成年牦牛（3~5岁）的肝脏、乳腺、大肠、肾等组织及处于卵泡期、红体期、黄体期的卵巢。提取各组织的总RNA，并通过反转录PCR（Reverse transcription PCR，RT-PCR）扩增获得牦牛SIRT7的基因序列。通过不同的生物信息学软件比对SIRT7基因的序列同源性、构建系统进化树以及预测牦牛SIRT7所编码蛋白的结构和功能。采用实时荧光定量PCR（Quantitative real-time PCR，qRT-PCR）方法检测SIRT7 mRNA在牦牛各组织和不同发情时期卵巢中的表达。结果显示，牦牛SIRT7基因的开放阅读框（Open reading frame，ORF）大小为1 203 bp，编码400个氨基酸。牦牛SIRT7基因的核苷酸序列与黄牛、绵羊、山羊的同源性较高。SIRT7蛋白为亲水性蛋白。二级结构由α-螺旋（47.4%）、β-折叠（29.7%）、β-转角（15.7%）及无规卷曲（7.2%）组成。磷酸化和糖基化分析结果表明，SIRT7蛋白有38个磷酸化位点，24个O-糖基化位点。荧光定量结果为，SIRT7 mRNA在牦牛的肾中表达最高。在牦牛卵巢中，卵泡期、红体期、黄体期SIRT7 mRNA的表达量呈持续升高的趋势，其中黄体期表达量最高。为揭示SIRT7在牦牛生长发育，尤其是卵巢发育过程中的调控作用提供一定的基础数据。

来源：2021年第2期

《华北农学报》期刊编辑部

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