华北农学报

作者：邹杰

单位：宜春学院 生命科学与资源环境学院, 江西省作物生长发育调控重点实验室, 江西 宜春 336000

关键词：水稻,<i>OsGRAS39</i>,表达特征,CRISPR/Cas9,基因编辑,

基金：国家自然科学基金项目（31460061）；江西省自然科学基金项目（20142BAB214014）

旨在探究水稻OsGRAS39（LOC_Os10g22430.1）基因的功能，采用qRT-PCR技术分析OsGRAS39在水稻不同组织中及不同非生物胁迫条件、ABA和GA3处理下的表达情况，并基于CRISPR/Cas9技术创建OsGRAS39基因敲除突变体。qRT-PCR分析结果表明，OsGRAS39在所有检测的组织中均表达，其mRNA丰度在水稻幼苗中最高，然后依次是幼根、叶片，而在抽穗期水稻的叶鞘、穗、根和茎中相对较弱；OsGRAS39的表达受高温胁迫抑制，受低温、NaCl和ABA诱导；在10% PEG6000处理下，其在所有处理时间点的表达水平无显著差异；在20 μmol/L的GA3处理下，其表达水平在2~8 h下调而在24 h上调。另外，利用无缝克隆技术成功构建了OsGRAS39基因的CRISPR/Cas9敲除载体pP1C.3-OsGRAS39-gRNA，并通过农杆菌介导的遗传转化获得30株转基因水稻株系。靶位点测序结果表明，30株转基因阳性水稻苗中有8株检测到不同类型的突变，包括1个纯合突变体，5个双等位突变体和2个杂合突变体。综上，OsGRAS39可能参与水稻对高温、低温和NaCl胁迫抗性的调控；成功创建了OsGRAS39基因敲除突变体。

来源：2020年第6期

《华北农学报》期刊编辑部

查看华北农学报杂志2020年第6期