华北农学报

作者：荣恒, 张梦瑶, 贺建宁, 柳楠

单位：青岛农业大学 动物科技学院, 山东 青岛 266109

关键词：敖汉细毛羊,同源重组技术,成纤维细胞,RT-PCR,Western Blot,

基金：国家绒毛用羊产业技术体系项目（CARS-39-05）；山东省农业良种工程（2019LZGC012）

旨在构建敖汉细毛羊BMP6、BMPR1B基因的过表达载体，而后将其导入成纤维细胞，分析转染后两基因mRNA、蛋白表达量的变化及基因间相互作用对毛囊的影响。选择40日龄敖汉细毛羊胎羊，采集组织样品，提取RNA后反转录成cDNA，通过PCR反应后利用SoSo试剂盒将纯化的目的片段与表达载体pcDNA3.1连接。酶切鉴定正确后，转至大肠杆菌DH5α感受态细胞，振荡培养并挑取单菌落扩大培养。提取质粒后将pcDNA3.1-BMP6、pcDNA3.1-BMPR1B单、共转染至成纤维细胞中。转染后测定表达量的变化并探究两基因间的作用关系。结果表明，共转染成纤维细胞后BMPR1B基因及BMPR1B蛋白的表达量均较单转染组极显著升高（P<0.01），而BMP6基因及BMP6蛋白的表达量与单转染组无显著差异（P>0.05）。因此，BMP6基因促进了BMPR1B基因的表达，BMPR1B基因对BMP6基因的表达几乎没影响。

来源：2020年第6期

《华北农学报》期刊编辑部

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