华北农学报

作者：刘晓东, 李海山, 孟川, 王玉海, 吴芳, 牟金贵, 马俊贤, 王明秋

单位：1. 河北省农林科学院 经济作物研究所, 河北省蔬菜工程技术中心, 河北 石家庄 050051;；2. 河北省农林科学院, 河北 石家庄 050031;；3. 河北省市场监督管理局, 河北 石家庄 050091

关键词：大白菜,新型甘蓝型油菜CMS,雄性不育系,引物设计,分子标记,

基金：河北省农林科学院创新工程项目（2019-3-1-1）；河北省科学技术研究与发展计划（16226304D-1）；国家重点研发计划（2016YFD0101701）；国家大宗蔬菜产业技术体系项目（CARS-23-G-05）；河北省巨人计划—蔬菜创新团队建设（2019-2021）；河北省“三三三人才工程”项目（A202002020）

针对目前甘蓝型油菜Pol CMS、新型萝卜胞质Ogu CMS、新型甘蓝型油菜CMS鉴定过程中，存在必须从orf138、orf222、orf224 3种引物中选用2对引物进行分子标记互相验证鉴定的缺点。以开发快速鉴别新型甘蓝型油菜CMS的分子标记为目的，选取含有Pol CMS的CMS-AQ29和含有新型甘蓝型油菜CMS的CMS后36高的2个材料基因组DNA为模板，通过引物orf222进行PCR扩增，经测序对比2种类型细胞质雄性不育系的核苷酸序列差异，确定主要差异区域为180~210 bp。通过orf222上游引物末端T/G碱基的错配，设计开发了快速鉴定新型甘蓝型油菜CMS的专用引物O-2，该引物可扩增出470 bp的核苷酸序列，而不含有新型甘蓝型油菜CMS的材料则不能扩增出核苷酸序列，具有能一次性快速鉴定出含有新型甘蓝型油菜CMS不育基因材料的特点。利用该引物对转育了新型甘蓝型油菜CMS的材料CMS-D571、CMS-D574及对应的保持系D571、D574分别进行了鉴定，证实雄性不育系CMS-D571、CMS-D574为转育了新型甘蓝型油菜CMS的雄性不育系，结果表明该方法稳定可靠。

来源：2020年第5期

《华北农学报》期刊编辑部

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