华北农学报

作者：栾庆东, 孙举, 刘均华, 张本清, 尹燕博, 王建琳

单位：1. 青岛农业大学 动物医学院, 山东 青岛 266109;；2. 青岛博隆基因工程有限公司, 山东 青岛 266021;；3. 青岛市农业行政执法支队, 山东 青岛 266071;；4. 青岛市黄岛区农业农村局, 山东 青岛 266400

关键词：FAdV,Fiber蛋白,原核表达,交叉中和,

基金：国家重点研发计划项目（2016YFD0500800）

为确定FAdV-4、FAdV-8a、FAdV-8b、FAdV-11这4个血清型FAdV间存在的交叉保护是否与病毒的纤维蛋白（Fiber）有关，制备4个血清型FAdV Fiber蛋白抗血清，在细胞水平研究其对本血清型和其他3种血清型病毒感染的中和作用。针对4个血清型FAdV的Fiber基因设计引物，进行PCR扩增，构建pCold-FAdV-Fiber重组质粒，分别转入BL21（DE3）感受态细胞，经IPTG诱导表达，通过SDS-PAGE和Western Blot鉴定表达产物；表达产物纯化后免疫SPF鸡，采集抗血清，通过LMH细胞研究不同血清型Fiber蛋白血清对各血清型FAdV感染的中和作用。PCR扩增结果显示，FAdV-4、FAdV-8a、FAdV-8b、FAdV-11 Fibe r基因产物大小分别为1 440，1 575，1 566，1 719 bp；重组菌在16℃培养条件下，1.0 mmol/L的IPTG诱导24 h可溶性重组蛋白的表达量最高；SDS-PAGE和Western Blot结果显示，FAdV-4、FAdV-8a、FAdV-8b、FAdV-11表达的蛋白分子量大小分别为102，107，107，112 ku；中和结果显示，FAdV-4、FAdV-8b和FAdV-11 Fiber蛋白抗血清能中和自身血清型FAdV对细胞的感染，不能中和其他血清型FAdV的感染，而FAdV-8a Fiber蛋白抗血清不能中和这4种血清型中的任何一种血清型FAdV的感染。综上，Fiber蛋白与4个血清型FAdV全病毒之间存在的交叉保护无直接关系。

来源：2020年第5期

《华北农学报》期刊编辑部

查看华北农学报杂志2020年第5期