华北农学报

作者：王伟, 王俊, 鲍玉月, 栗春霞, 崔智慧, 韩英鹏, 李文滨

单位：东北农业大学 大豆研究所, 大豆生物学教育部重点实验室, 农业部东北大豆生物学与遗传育种重点实验室, 黑龙江 哈尔滨 150030

关键词：大豆,维生素E,<i>GmVE2</i>基因,基因克隆,功能预测,表达分析,

基金：国家科技重大专项和重点研发项目（课题）省级资助项目（GX17B002）；国家自然基金面上项目（31671717）；黑龙江省杰出青年基金项目（JC2018007）；黑龙江省博士后项目（LBH-Q17015）

大豆GmVE2基因是一种NAD（P）H脱氢酶，主要存在于高等植物叶绿体类囊体膜上，可参与氧化应激反应以及叶绿体PSⅠ电子循环传递。为了探究其功能，通过RT-PCR方法从东农50中克隆获得GmVE2基因的CDS全长序列。利用ExPASy-ProtParam等在线软件对GmVE2蛋白序列进行理化性质分析，预测结果表明，GmVE2基因编码区共编码167个氨基酸，分子式为C904H1326N208O246S10，分子质量为19.364 3 ku，总原子数为2 694，理论等电点（pI）为4.78，脂肪指数为87.01；蛋白正负电荷残基数分别为11和23；GmVE2蛋白的不稳定系数和GRAVY值分别为25.02和0.043，说明该蛋白是稳定的疏水性蛋白；蛋白存在跨膜结构、信号肽和磷酸化位点。将线性植物表达载体与目的片段进行连接，成功构建pCambia3300-GmVE2植物表达载体。通过qRT-PCR技术和高效液相色谱（HPLC）分别对动态籽粒及组织基因表达量和维生素E含量进行测定，结果表明，该基因表达量与生育期籽粒维生素E含量呈负相关（-0.951*），且维生素E含量在绿色组织中显著高于其他组织。本研究对大豆基因GmVE2与维生素E含量的调控关系进行初步研究，为高大豆维生素E含量的大豆新品种选育提供理论和实践基础，为后期研究GmVE2基因功能提供科学依据。

来源：2020年第3期

《华北农学报》期刊编辑部

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