华北农学报

作者：李论, 柯杰, 黄钢, 刘红诗, 宋燕妮, 张英洁, 陈利红

单位：江汉大学 系统生物学研究院, 湖北 武汉 430056

关键词：二穗短柄草,<i>BdDREB1-like</i>,表达载体构建,遗传转化,

基金：国家自然科学基金青年科学基金（31601995）

为了研究二穗短柄草BdDREB1-like基因在转基因烟草中的功能，克隆了该基因，并进行了生物信息学分析。该基因开放阅读框684 bp，编码228个氨基酸，编码蛋白的分子量为24.178 ku，只含有一个典型的AP2结构域，属于AP2/EREBP（APETALA2/ethylene-responsive element binding protein）超家族的DREB家族。多序列比对与进化分析显示它与黑麦ScCBFI的亲缘关系较近。亚细胞定位分析表明，BdDREB1-like基因定位于细胞核。将其构建到植物表达载体上，并通过农杆菌介导法转入烟草中。PCR和RT-PCR筛选鉴定显示BdDREB1-like基因不仅整合到烟草基因组中而且还能稳定表达。过氧化氢胁迫条件下，转BdDREB1-like基因烟草幼苗具有较高的发芽率。为了进一步确定BdDREB1-like基因与氧化胁迫的关系，又对一个月大的转基因烟草进行氧化胁迫（MV，甲基紫精）处理。结果表明，在正常生长条件下，T3转基因株系除了SOD含量外，测定的其他各种生理指标均与野生型无显著差异，T1转基因株系中只有POD和叶绿素含量与野生型中的有显著差异；而在氧化胁迫处理条件下，转BdDREB1-like基因的烟草植株相对于野生型具有较高的过氧化氢酶、过氧化物酶、超氧化物歧化酶和叶绿素的含量和较低的丙二醛和过氧化氢含量。这些结果表明，过表达BdDREB1-like基因增强了植物对氧化胁迫的耐受性。

来源：2020年第2期

《华北农学报》期刊编辑部

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