华北农学报

作者：王俊, 董海冉, 常宏, 王伟, 包冬芳, 赵孝岳, 赵雪, 韩英鹏

单位：东北农业大学,黑龙江 哈尔滨 150030

关键词：大豆,异黄酮类,糖基转移酶,候选基因,农杆菌转化,克隆,基因功能鉴定,

基金：国家科技重大专项和重点研发项目（课题）省级资助项目（GX17B002）；黑龙江省杰出青年基金项目（JC2018007）；黑龙江省博士后项目（LBH-Q17015）；国家重点研发计划项目（2016YFD0100304）；国家自然基金面上项目（31671717）

UGT是一类糖基转移酶，它对黄酮类化合物进行糖基化修饰，合成异黄酮糖苷，在异黄酮的合成、转运、存储等方面发挥了重要的作用。为了探索UGT功能，通过RT-PCR方法从中豆27中克隆获得GmUGT73基因的CDS全长序列。利用ProtParam tool等在线软件对GmUGT73蛋白序列及理化性质进行分析，预测结果表明，GmUGT73基因的编码区编码464个氨基酸，分子质量为51.186 5 ku，理论等电点（pI）为6.27，总原子数为7 176，分子式为C2281H3580N608O685S22。GmUGT73蛋白总正电和负电残基数分别为37和41，蛋白的不稳定系数为36.93，表明该蛋白较稳定，蛋白的脂溶指数为86.19，GRAVY值为-0.111，说明该蛋白为亲水性蛋白。将线性植物表达载体与目的片段进行连接，成功构建pCambia3300-GmUGT73植物表达载体，通过发根农杆菌介导法转化大豆毛状根并获得转基因阳性根系，利用高效液相色谱（HPLC）对根系进行异黄酮含量测定，结果表明，转基因阳性根中异黄酮含量与对照相比极显著提高（P<0.01），说明该基因可能具有促进合成大豆异黄酮的功能。

来源：2020年第2期

《华北农学报》期刊编辑部

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