华北农学报

作者：向娅, 柴志欣, 王吉坤, 信金伟, 王会, 王嘉博, 武志娟, 钟金城, 姬秋梅

单位：1. 西南民族大学 青藏高原动物遗传资源保护与利用四川省、教育部重点实验室, 四川 成都 610041;；2. 省部共建青稞和牦牛种质资源与遗传改良国家重点实验室, 西藏 拉萨 850000

关键词：牦牛,肌钙蛋白I基因家族,克隆,组织表达,

基金：西南民族大学研究生创新型科研项目（CX2019SZ72）；国家肉牛牦牛产业技术体系项目（CARS-37）；西藏自治区财政专项项目（XZNKY-2019-C-052）；青藏高原生态畜牧业协同创新中心开放基金项目（QZGYXT02）

为了克隆TNNI基因家族，预测其蛋白结构和功能，并分析其在牦牛不同组织中的表达差异，以0.5岁健康的类乌齐牦牛为试验材料，采用RT-PCR技术克隆牦牛肌钙蛋白I基因家族的CDS区序列并进行生物信息学分析，利用实时荧光定量PCR技术检测TNNI基因家族各成员的mRNA表达水平。结果表明，TNNI1、TNNI2和TNNI3基因CDS区大小分别为564，549，639 bp，分别编码187，182，212个氨基酸残基。预测分析结果显示：TNNI基因家族编码的蛋白质均为偏碱性蛋白，蛋白结构不稳定，均无跨膜结构域，无信号肽，属非分泌型蛋白；二、三级结构均以α-螺旋为主，均含有肌蛋白超家族保守结构域。系统进化树分析表明：类乌齐牦牛TNNI1基因与水牛的亲缘关系最近，其次是绵羊、黄牛，与小鼠亲缘关系最远；TNNI2和TNNI3均与黄牛、水牛的亲缘关系较近，与其他亲缘关系较远。实时荧光定量PCR结果显示，TNNI1和TNNI2基因在臀肌中的相对表达量最高，且TNNI1基因在心脏、肝脏和肺脏中的表达量显著高于TNNI2基因（P<0.05），TNNI3基因在心脏中表达量较高，而在肺脏、臀肌和肝脏中表达量低。

来源：2020年第2期

《华北农学报》期刊编辑部

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