华北农学报

作者：杨勤, 柴志欣, 王吉坤, 王会, 钟金城

单位：西南民族大学 青藏高原动物遗传资源保护与利用四川省、教育部重点实验室, 四川 成都 610041

关键词：牦牛,<i>ACTA1</i>基因,启动子区,DNA甲基化,重亚硫酸氢盐测序,组织表达,

基金：四川省科技厅应用基础项目（2019YJ0256）；国家肉牛牦牛产业技术体系（CARS-37）；西南民族大学研究生创新型科研项目（CX2018SZ114）

为了探究骨骼肌α肌动蛋白1（ACTA1）基因在肌肉和脂肪等6个组织中的甲基化状态及mRNA表达水平，以类乌齐牦牛、麦洼牦牛为研究对象，成功克隆了牦牛ACTA1基因启动子区序列，且采用重亚硫酸氢盐测序法（BSP）检测ACTA1基因启动子区甲基化模式，并通过实时荧光定量PCR检测ACTA1基因在臀大肌、心脏、肾脏、肺脏、肝脏和脂肪组织中的mRNA表达水平。结果显示，牦牛ACTA1基因转录起始位点上游及第一外显子区部分序列总长为1 028 bp；BSP法分析发现肌肉组织DNA甲基化水平最低，脂肪组织甲基化率最高，其中，类乌齐牦牛臀大肌、心脏、肾脏、肺脏、肝脏和脂肪的甲基化概率分别为6.25%，6.88%，20.00%，16.25%，26.25%，29.38%，麦洼牦牛臀大肌、心脏、肾脏、肺脏、肝脏和脂肪的甲基化概率分别为5.00%，7.50%，18.13%，20.00%，26.25%，28.75%； ACTA1基因mRNA表达量在肾脏、肺脏、肝脏和脂肪均极显著低于臀大肌（P<0.01），且显著低于心脏（P<0.05），类乌齐牦牛和麦洼牦牛心脏mRNA表达量具有显著性差异（P<0.05），类乌齐牦牛肺脏组织甲基化率显著低于麦洼牦牛（P<0.05），其他各组织甲基化率和mRNA表达量差异均不显著（P>0.05），各组织甲基化水平与ACTA1基因mRNA表达量呈极显著负相关（r=-0.797，P=0.002）。结果表明， ACTA1基因DNA甲基化模式对肌肉发育具有一定的调控作用，可为牦牛遗传育种表观遗传标记提供部分数据支持。

来源：2020年第1期

《华北农学报》期刊编辑部

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