华北农学报

作者：陈利达, 袁军海, 李磊, 石延霞, 柴阿丽, 谢学文, 李宝聚

单位：1. 中国农业科学院 蔬菜花卉研究所, 北京 100081;；2. 河北北方学院, 河北 张家口 075061

关键词：镰孢菌,实时荧光定量PCR,湿度,病残体,

基金：国家重点研发计划项目（2017YFD0200603；2016YFD0201000）；农业部园艺作物遗传改良重点开放实验室

为了建立一种快速检测镰孢菌属的方法。根据Fusarium翻译延伸因子（TEF-1α）基因序列，设计并筛选其特异性引物F8-1/F8-2，能从靶标基因组DNA中特异性扩增出大小为187 bp的目的片段，建立Fusarium荧光定量PCR （RT-PCR）检测体系的灵敏度比常规PCR高104倍，且特异性良好。利用该反应体系检测不同湿度环境下病残体和土壤病残体DNA含量的动态变化。结果表明：病残体及土壤病残体DNA初始拷贝数分别为6.90×1011 ，1.06×1012拷贝数/g，经过温度27℃、80%湿度下处理30 d病残体DNA含量下降至5.55×108和0拷贝数/g，而在温度27℃、20%湿度下含量分别为8.04×109，1.30×109拷贝数/g。因此，建立的Fusarium实时荧光定量PCR检测体系具有特异性强、灵敏度高的特点，可以快速准确地定量检测病残体DNA的含量，为瓜类根腐病的早期预防和流行监测提供了有效的技术手段。

来源：2019年第S1期

《华北农学报》期刊编辑部

查看华北农学报杂志2019年第S1期