华北农学报

作者：张曦予, 贺慧, 李祯, 邢蔓, 洪波, 官春云

单位：湖南农业大学, 国家油料改良中心湖南分中心, 湖南 长沙 410128

关键词：甘蓝型油菜,FT基因,表达,<i>A7-FT</i>启动子,拟南芥,

基金：国家“973”计划项目（2015CB150206）；湘财农指（2016）114号

为了利用PCR技术得到甘蓝型油菜A7-FT基因启动子序列，根据甘蓝型油菜全基因组序列，利用启动子在线预测软件预测其功能与结构，根据其预测的顺式元件的分布，从5'端开始缺失的方式获得5个不同片段长度的启动子序列。构建含不同片段长度启动子的GUS基因表达载体，利用农杆菌介导拟南芥，得到T2幼苗，经过GUS染色与脱色，探讨A7-FT基因启动子的功能，为研究甘蓝型油菜开花调控机制提供理论基础。通过PCR技术从甘蓝型油菜湘油15号基因DNA中获得A7-FT基因启动子序列。利用PLACE和PlantCARE在线工具对该段序列进行预测，发现A7-FT基因启动子除了存在启动子核心元件CAATbox和TATAbox，还有光应答元件、激素应答元件、胚乳表达应答元件、抗逆性应答元件、生理控制相关的顺式作用元件。基于预测的顺式作用元件的分布情况，设计特异性引物，克隆不同片段长度启动子，与pCAMBIA1303载体构建5'端缺失载体，分别命名为M1、M2、M3、M4、M5。通过农杆菌介导拟南芥，GUS染色与脱色结果显示，在-1 549~-238可能存在一些负调控元件的结合位点，而-238~+1区域是该启动子的核心区段。

来源：2019年第2期

《华北农学报》期刊编辑部

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