华北农学报

作者：刘晓柱, 李银凤

单位：贵州理工学院, 贵州 贵阳 550003

关键词：荠菜,生长素极性运输基因1,基因克隆,表达分析,

基金：贵州省科技计划项目（黔科合基础[2018]1069）；贵州省科技计划项目（黔科合平台人才[2017]5789）

为了探讨荠菜PIN1基因的生物学功能，根据GenBank中拟南芥PIN1氨基酸序列，设计同源引物，通过RT-PCR技术，克隆了荠菜PIN1基因（CbPIN1）编码区cDNA序列；生物信息学方法分析了荠菜PIN1蛋白结构特征，并进行了亚细胞定位与原核表达；荧光定量PCR方法检测了PIN1组织表达特性；构建了植物表达载体pBI121-CbPIN1 ，并获得转基因植株。结果表明，CbPIN1 cDNA序列全长1 869 bp，C+G含量为49%。Blast比对结果显示，CbPIN1与拟南芥PIN1基因高度同源，相似性高达93%。进一步分析发现，CbPIN1可编码1条622个氨基酸的多肽，CbPIN1蛋白分子质量为67.05 ku，等电点为9.02，碱性氨基酸（K、R）个数为49，酸性氨基酸（D、E）个数为42，疏水氨基酸（A、I、L、F、W、V）个数为241，极性氨基酸（N、C、Q、S、T、Y）个数为157。CbPIN1属于跨膜蛋白，含12个丝氨酸磷酸化位点，1个苏氨酸磷酸化位点。亚细胞定位结果显示，CbPIN1定位于细胞膜；CbPIN1在荠菜不同组织均有表达，其中，根中表达最高，种子中表达最低。原核表达显示CbPIN1蛋白大小87.05 ku。过表达荠菜植株中CbPIN1基因表达量均显著增加。试验结果为进一步分析CbPIN1在荠菜器官发育中的作用奠定了基础。

来源：2019年第1期

《华北农学报》期刊编辑部

查看华北农学报杂志2019年第1期