华北农学报

作者：却志群, 於紫蕾, 沈春修

单位：宜春学院 生命科学与资源环境学院, 江西省作物生长发育调控重点实验室, 江西 宜春 336000

关键词：水稻,膜联蛋白,<i>OsAnn8</i>,荧光定量PCR,CRISPR/Cas9,

基金：2016年国家自然科学基金项目（31660379）；2017年江西省自然科学基金项目（20171BAB214027）；2018年江西省教育厅科学技术研究项目（GJJ180845）；2018年江西省教育厅科学技术研究项目（GJJ180844）；2018年江西省作物生长发育调控重点实验室开放课题项目（KFJJ201804）

为了阐明水稻膜联蛋白基因家族成员OsAnn8在干旱和低温胁迫条件下的功能作用机制，通过荧光定量PCR技术对不同干旱和低温处理下的水稻叶片中OsAnn8基因进行转录水平上的定量分析，结果表明，OsAnn8基因在干旱胁迫处理前后表达量呈现出高-低-高的变化趋势，而在冷胁迫处理前后表达量则呈现出低-高-低-低的变化。随后，利用CRISPR/Cas9基因编辑技术对OsAnn8基因进行定点编辑，并借助农杆菌介导将OsAnn8基因靶位点的CRISPR/Cas9基因编辑植物表达载体导入转基因受体品种TP309，经潮霉素筛选后共获得32株转基因阳性植株，靶位点扩增测序峰图分析表明其中的2个单株出现了重叠峰，进一步的T载体克隆分别测序表明，这2个单株为单等位基因敲除，说明本研究已经成功获得了OsAnn8基因靶位点敲除的单等位突变体，不同类型的水稻OsAnn8基因突变体的创建，为水稻膜联蛋白基因家族成员OsAnn8在非生物胁迫条件下的功能研究奠定了材料基础。

来源：2019年第1期

《华北农学报》期刊编辑部

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